Caldo lauril sulfato Britania
Más detalles
El caldo lauril sulfato (lauril sulfato triptosa, LST) Britania es un medio de cultivo deshidratado y selectivo para la detección y el recuento de coliformes en aguas, aguas residuales y alimentos. Es el medio que recomienda APHA para la prueba presuntiva de coliformes con la técnica del Número Más Probable (NMP). Se presenta en polvo y se prepara en el laboratorio. Viene en envases de 100 g y 500 g, y en RIETBEL somos representantes oficiales de Britania.
Cómo funciona
Es un medio rico en nutrientes que favorece el desarrollo rápido de los microorganismos que fermentan la lactosa, incluso los de fermentación lenta. El lauril sulfato de sodio inhibe la flora acompañante, y los fosfatos mantienen el pH estable. Cuando los coliformes fermentan la lactosa producen ácido y gas, y el gas queda atrapado en la campana de Durham: tubo con crecimiento y gas, resultado positivo.
¿Para qué se usa?
- Prueba presuntiva de coliformes en aguas de consumo, de proceso y residuales.
- Recuento de coliformes por la técnica del Número Más Probable.
- Control microbiológico de alimentos y productos lácteos.
- Prácticas de microbiología en universidades e institutos.
Lo usan plantas de agua, bebidas, lácteos y alimentos, plantas de tratamiento de aguas y efluentes, y laboratorios de servicios y de control de calidad interno. Es parte de los medios de cultivo para el control de coliformes.
Cómo se prepara
- Suspendé 35,6 g de polvo en 1 litro de agua purificada y dejalo reposar 5 minutos.
- Calentá con agitación frecuente hasta ebullición y disolución total.
- Distribuí en tubos que contengan campanas de Durham.
- Esterilizá en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
Siembra e incubación por NMP
- Aguas y otras muestras líquidas: se siembra por triplicado 10 ml de muestra en caldo de doble concentración, y 1 ml y 0,1 ml en caldo de concentración simple.
- Alimentos y otras muestras sólidas: se preparan diluciones 1:10, 1:100 y 1:1000, y cada una se siembra por triplicado en caldo de concentración simple.
Se incuba entre 33 y 37 °C durante 18 a 48 horas. Con los tubos positivos se calcula el NMP por 100 ml en las muestras líquidas, o por gramo en las sólidas.
¿Cuánto rinde cada envase?
En concentración simple se usan 35,6 g por litro. A 10 ml por tubo, el envase de 100 g alcanza para unos 2,8 litros, o unos 280 tubos, y el de 500 g, para unos 14 litros, o unos 1.400 tubos. El caldo de doble concentración lleva el doble de polvo por litro, así que, si analizás aguas, calculá menos tubos por envase.
Fórmula y conservación
| Triptosa | 20,0 g/l |
| Lactosa | 5,0 g/l |
| Cloruro de sodio | 5,0 g/l |
| Fosfato dipotásico · fosfato monopotásico | 2,75 g/l cada uno |
| Lauril sulfato de sodio | 0,1 g/l |
| pH final | 6,8 ± 0,2 |
| Polvo | Beige; se guarda entre 10 y 35 °C, bien cerrado |
| Medio preparado | Ámbar; se conserva entre 25 y 30 °C |
Lauril sulfato o Mac Conkey: ¿cuál elijo?
Los dos caldos se usan para el recuento presuntivo de coliformes por NMP, en tubos con campana de Durham. Cambian el agente selectivo y la forma de leer el resultado:
| Caldo lauril sulfato | Caldo Mac Conkey | |
|---|---|---|
| Agente selectivo | Lauril sulfato de sodio | Bilis de buey |
| Lectura | Crecimiento y gas | Viraje de púrpura a amarillo y gas |
| Referencia | Recomendado por APHA | Fórmula según las farmacopeas EP, JP y USP |
Usá el que pida tu método.
Preguntas frecuentes
¿Se esteriliza en autoclave? Sí, a 121 °C durante 15 minutos, según la hoja técnica de Britania.
¿Hace falta la campana de Durham? Sí, si querés detectar la producción de gas. Se coloca invertida dentro del tubo antes de esterilizar.
¿A qué temperatura y por cuánto tiempo se incuba? Entre 33 y 37 °C, durante 18 a 48 horas. Si tu método fija otra condición, seguí la del método.
¿Por qué el medio preparado se enturbia en la heladera? En frío suele flocular o formar un precipitado. Por eso se conserva entre 25 y 30 °C, donde se mantiene claro.
¿Mide E. coli? Detecta coliformes en general y el resultado es presuntivo. Para confirmar y distinguir especies hacen falta pruebas adicionales.
¿Es de uso doméstico? No. Es un producto de laboratorio, para uso profesional.
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